A Espectrofotometria é uma das técnicas analíticas mais fundamentais em laboratórios de todo o mundo. Em essência, ela é o estudo quantitativo de como a luz interage com a matéria, permitindo identificar e quantificar substâncias com altíssima precisão.
1. O Conceito Fundamental: Luz e Matéria
A técnica baseia-se na emissão de um feixe de luz em um comprimento de onda específico através de uma amostra. Ao atravessar o meio, parte dessa luz é absorvida pelas moléculas e a parte restante é transmitida. O espectrofotômetro mede essa diferença, gerando dados cruciais para a pesquisa farmacêutica, biotecnologia e controle de qualidade industrial.
2. Absorbância, Transmitância e a Lei de Beer-Lambert
Para interpretar os resultados, utilizamos dois parâmetros principais:
- Transmitância (%T): A porcentagem de luz que atravessa a amostra sem ser retida.
- Absorbância (Abs): A medida da luz que foi absorvida. É inversamente proporcional à transmitância.
A relação entre esses dados e a concentração da amostra é regida pela Lei de Beer-Lambert, que estabelece que a absorbância é diretamente proporcional à concentração da substância e ao caminho óptico percorridos pela luz.
Dica de Especialista: Para garantir que a Lei de Beer-Lambert seja válida, o equipamento deve ter o mínimo de "luz espúria". Você pode entender mais sobre como escolher o hardware ideal no nosso Guia de Tecnologias e Marcas.
3. Aplicações: Do UV-Vis à Absorção Atômica
A espectrofotometria se divide principalmente pela faixa do espectro eletromagnético utilizada:
- UV (Ultravioleta): Essencial para DNA e proteínas (185 nm a 400 nm).
- Vis (Visível): Utilizado em análises colorimétricas (400 nm a 700 nm).
- Absorção Atômica (AAS): Uma técnica avançada para a detecção de metais pesados, focada em átomos livres.
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