A ascensão dos imunoterapêuticos baseados em anticorpos monoclonais (mAbs) redefiniu as estratégias da indústria farmacêutica. Na Biosystems, atuando no suporte técnico de alta performance desde 1990, observamos que o maior gargalo no desenvolvimento de biossimilares é a caracterização funcional robusta. Este artigo explora a transição dos métodos radioativos tradicionais para fluxos de trabalho automatizados e seguros para ensaios ADCC e CDC.
1. Mecanismos de Citotoxicidade: ADCC e CDC
A avaliação da eficácia de um anticorpo terapêutico exige a mensuração da sua capacidade de induzir a morte da célula alvo através de dois caminhos principais:
- ADCC (Citotoxicidade Celular Dependente de Anticorpos): Onde células efetoras do sistema imune (como NK cells) reconhecem o anticorpo ligado à célula alvo e liberam citotoxinas.
- CDC (Citotoxicidade Dependente de Complemento): Onde a cascata do complemento é ativada na superfície da célula, resultando na formação do complexo de ataque à membrana e lise celular.
Historicamente, estes ensaios utilizavam a liberação de Cromo-51 radioativo. Hoje, a tecnologia BioTek permite realizar estas medições via luminescência ou fluorescência (liberação de calceína-AM), integrando-se perfeitamente aos protocolos de Ensaios de Viabilidade Celular.
2. Precisão na Dispensação com MultiFlo FX
A reprodutibilidade em ensaios baseados em células depende criticamente da uniformidade da semeadura. Variações na densidade celular entre os poços invalidam o cálculo da relação Efetora:Alvo (E:T).
O uso do MultiFlo FX automatiza a adição de anticorpos e células com baixo cisalhamento, garantindo que o coeficiente de variação (CV) permaneça mínimo. Este nível de controle é o que separa um ensaio exploratório de uma validação farmacêutica rigorosa.
3. Lavagem de Precisão: O Papel da 405 TS
A remoção de indicadores não incorporados ou o excesso de reagentes exige uma lavagem que não descole as células aderentes ou perturbe o pellet de células em suspensão. A lavagem manual é a principal fonte de ruído em ensaios analíticos.
A Lavadora 405 TS, equipada com manifolds específicos para células, providencia o controle de fluxo e aspiração necessário para garantir um background mínimo, essencial para a detecção de sinais fracos em imunoterapia. Para entender a tecnologia por trás deste processo, consulte nosso guia sobre Automação na Lavagem de Microplacas.
4. Detecção de Elite com Synergy Neo2
Para a captura dos dados finais, o uso de um leitor multimodal é indispensável. O ensaio de calceína exige alta sensibilidade em Fluorometria, enquanto os ensaios de repórter (luciferase) demandam luminescência ultra-estável.
A Synergy Neo2, com seus PMTs duplos e óptica baseada em filtros ou monocromadores, oferece o desempenho necessário para triagem de alta vazão (HTS), permitindo a caracterização rápida de múltiplos clones de anticorpos em uma única plataforma.
Soluções para Imunoterapia e Biossimilares
A Biosystems integra hardware de elite e expertise em aplicação para automatizar seus ensaios de citotoxicidade.
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