A compreensão das vias que controlam a progressão tumoral é um dos pilares da oncologia moderna. Um ponto crítico nesse processo é a interrupção do ciclo celular, onde a proteína retinoblastoma (pRb) desempenha um papel fundamental. Na Biosystems, acompanhando a inovação em Drug Discovery desde 1990, destacamos que a capacidade de quantificar a pRb endógena permite monitorar com precisão a eficácia de novos agentes antitumorais.
O Ensaio HTRF e a Transição de Fase G0/G1
A transição das células da fase de repouso (G0) para a síntese de DNA (fase S) é controlada pela fosforilação da pRb por quinases dependentes de ciclina (CDKs). Através da tecnologia HTRF (Fluorescência de Tempo Resolvido Homogênea), é possível quantificar o estado de fosforilação desta proteína em um formato de placa de 384 poços, eliminando etapas de lavagem e acelerando o screening de inibidores.
Synergy Neo2: Sensibilidade Elevada com TRF Laser
Para ensaios complexos de HTRF, a escolha do leitor de microplacas é decisiva. O Agilent BioTek Synergy Neo2 destaca-se por sua configuração de ponta:
- TRF Laser: Proporciona uma fonte de excitação potente e focada, garantindo alta sensibilidade mesmo em baixas concentrações de proteína.
- Duplo PMT: Permite a detecção simultânea das emissões do doador e do aceitador, reduzindo o tempo de leitura para menos de 3 minutos em placas de 384 poços.
- Precisão em Inibidores: No estudo de caso com o inibidor Palbociclib, o sistema demonstrou um Z'-factor de 0,63, confirmando a robustez necessária para triagens de alto rendimento.
Impacto no Desenvolvimento de Terapias contra o Câncer
A automação deste fluxo de trabalho não apenas aumenta a velocidade das descobertas, mas assegura a reprodutibilidade dos dados. Como discutimos em nosso artigo sobre ultra-vazão em HTS, a integração entre ensaios celulares homogêneos e hardware de alta performance é o que permite identificar candidatos a fármacos com maior potencial clínico em tempo recorde.
Aprofundamento Técnico
Acesse os resultados completos de inibição, valores de IC₅₀ e detalhes do protocolo de HTRF para oncologia.
BAIXAR NOTA DE APLICAÇÃO (PDF)Conclusão
A quantificação de pRb via HTRF, aliada à potência do Synergy Neo2, representa o estado da arte no monitoramento do ciclo celular. Na Biosystems, provemos as ferramentas e o suporte técnico para que seu laboratório alcance a máxima precisão em Drug Discovery e biologia do câncer.
Eleve o Nível da sua Pesquisa Oncológica
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